結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
6 孔板是一種常見的細(xì)胞培養(yǎng)耗材,它由透明的聚苯乙烯材料制成。每個(gè)孔的直徑相對(duì)較大,一般可以提供足夠的空間用于類器官培養(yǎng)。孔板底部平坦,有利于類器官在底部均勻分布生長(zhǎng),并且便于在顯微鏡下觀察類器官的形態(tài)和生長(zhǎng)狀態(tài)。
適用范圍
適用于多種類器官的培養(yǎng)。例如,腸道類器官、肝臟類器官、胰腺類器官等都可以在 6 孔板中培養(yǎng)。對(duì)于起始細(xì)胞數(shù)量較多或者希望類器官生長(zhǎng)有一定空間的情況比較合適。如果是從少量組織樣本或者單細(xì)胞開始培養(yǎng)類器官,6 孔板的每孔空間可以滿足細(xì)胞增殖和類器官形成的初期需求。
與培養(yǎng)基的配合使用
在 6 孔板中培養(yǎng)類器官時(shí),根據(jù)不同類器官的要求加入特定的培養(yǎng)基。一般每孔可以加入適量的培養(yǎng)基,如 2 - 3 毫升左右,以保證類器官能夠充分浸泡在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中,同時(shí)又不會(huì)因?yàn)橐后w過多而導(dǎo)致類器官漂浮或者碰撞受損。培養(yǎng)基的成分可以根據(jù)類器官的類型進(jìn)行定制,包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如 DMEM/F12)、生長(zhǎng)因子(如 EGF、FGF 等)、營(yíng)養(yǎng)添加劑(如 N2、B27)等。
培養(yǎng)環(huán)境要求
6 孔板應(yīng)放置在溫度穩(wěn)定(通常 37℃)、濕度適宜(一般 95% 左右)、二氧化碳濃度(5%)的細(xì)胞培養(yǎng)箱中。這樣的環(huán)境可以保證培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,為類器官的生長(zhǎng)提供良好的條件。同時(shí),6 孔板的透明材質(zhì)便于觀察類器官的生長(zhǎng),在不打開培養(yǎng)箱的情況下,可以通過培養(yǎng)箱的觀察窗或者使用帶有成像功能的培養(yǎng)箱來監(jiān)測(cè)類器官的狀態(tài)。
操作便利性
6 孔板的孔數(shù)相對(duì)較少,在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)比較方便。例如,在更換培養(yǎng)基、添加藥物或者進(jìn)行其他處理時(shí),可以比較容易地對(duì)每個(gè)孔進(jìn)行操作,減少了實(shí)驗(yàn)操作過程中的失誤概率。而且,在需要進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)時(shí),6 孔板可以方便地設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每孔可以作為一個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)單元,有利于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的對(duì)比和分析。
培養(yǎng)過程中的注意事項(xiàng)
在接種細(xì)胞或者類器官起始材料時(shí),要注意均勻分布。可以通過輕柔搖晃或者用移液器緩慢滴加的方式,使細(xì)胞或起始材料均勻地分布在 6 孔板的底部。另外,由于 6 孔板的每孔面積相對(duì)較大,在培養(yǎng)過程中要注意防止污染,在打開培養(yǎng)箱和操作 6 孔板時(shí),要嚴(yán)格遵循無菌操作原則,如使用無菌鑷子、移液器和在無菌超凈臺(tái)內(nèi)操作等。